细胞培养是一种无菌操作技术，要求工作环境和条件必须无微生物污染和其他有害因素。棉花糖直播在线观看:实验室的设计原则(ze)是防(fang)止微生物污染和有(you)害因素，要(yao)求工作环境清(qing)洁(jie)、空气新鲜(xian)、干燥(zao)、无(wu)烟(yan)。细胞培养(yang)(yang)室(shi)的设计原则(ze)通常(chang)是无(wu)菌操作区位于运动较少的室(shi)内侧，常(chang)规操作和封闭培养(yang)(yang)在一个(ge)房(fang)间(jian)进行(xing)，而洗涤和消毒在另一个(ge)房(fang)间(jian)进行(xing)。

常用设施设备

(1)超净(jing)台面:又称净(jing)化(hua)台面，分(fen)为三(san)类:侧流型、直流型和(he)流出型。

(2)无菌手(shou)(shou)术室(shi):一般由三部分组成:更衣(yi)室(shi)、缓(huan)冲室(shi)和(he)(he)手(shou)(shou)术室(shi)。清洁台面和(he)(he)二氧(yang)化碳培养箱、离心机、倒(dao)置(zhi)显微镜等。放在手(shou)(shou)术室(shi)里。冰箱、冰箱和(he)(he)无菌物品可以放在缓(huan)冲室(shi)。

(3)手术室:普通培养箱、离心机(ji)、水浴槽(cao)、固定时钟、普通天平和每日分析处理。

(4)清洗消(xiao)毒(du)室:烤(kao)箱、消(xiao)毒(du)锅、蒸馏水处(chu)理器、酸罐等。

(5)分析:显微(wei)镜、计算机(ji)、打印机(ji)等(deng)。

cell culture实验室(shi)planning需要

culture vessel

常(chang)见(jian)的细胞培(pei)养(yang)(yang)容器包括培(pei)养(yang)(yang)瓶(ping)、培(pei)养(yang)(yang)板(ban)、培(pei)养(yang)(yang)皿(min)等。通(tong)常(chang)，制备(bei)量(liang)(liang)是使用量(liang)(liang)的三倍。容器应由透明性好、无(wu)毒(du)、有利于细胞粘附和生长的材(cai)料(liao)制成。通(tong)常(chang)使用一次性聚苯(ben)乙烯产品或中性硬度的玻璃产品。常(chang)用容器如下(xia):

(1)储(chu)液(ye)器:用于(yu)储(chu)存各种配制好的培养液(ye)、血(xue)清等液(ye)体(ti)，常用规(gui)格(ge)有500毫(hao)(hao)升、250毫(hao)(hao)升、100毫(hao)(hao)升等。

(2)培(pei)养(yang)瓶(ping)(ping):根(gen)据培(pei)养(yang)细(xi)胞(bao)类型的(de)要(yao)(yao)求，不(bu)同的(de)培(pei)养(yang)瓶(ping)(ping)有不(bu)同的(de)形状(zhuang)。用于(yu)细(xi)胞(bao)传代培(pei)养(yang)的(de)细(xi)胞(bao)要(yao)(yao)求瓶(ping)(ping)壁厚度均匀，这便(bian)于(yu)细(xi)胞(bao)贴壁生长(zhang)和观察(cha)。瓶(ping)(ping)口应大小(xiao)相同，口径(jing)一般不(bu)小(xiao)于(yu)1cm。允许吸管伸(shen)入(ru)瓶(ping)(ping)子的(de)任何部分(fen)，规格有200毫升(sheng)(sheng)、100毫升(sheng)(sheng)、50毫升(sheng)(sheng)、25毫升(sheng)(sheng)、10毫升(sheng)(sheng)等。

(3)培养皿:用于开放式培养和(he)其他(ta)用途，分为30毫(hao)米、60毫(hao)米、120毫(hao)米直径(jing)等。

(4)吸管(guan):通常使用长吸管(guan)和短吸管(guan)。长吸管(guan)也叫(jiao)(jiao)分级吸管(guan)。改(gai)进管(guan)的(de)上部(bu)设有球形刻度刻度改(gai)进吸管(guan)，刻度吸管(guan)用于移(yi)动(dong)液体。常用的(de)有1毫升(sheng)和10毫升(sheng)，短吸管(guan)也叫(jiao)(jiao)滴管(guan)、弯头和直(zhi)头两种(zhong)。

(5)离心管:离心管是细胞(bao)培养(yang)中使用(yong)最(zui)广泛的(de)容器。根据用(yong)途和(he)形式的(de)不同，细胞(bao)培养(yang)中常用(yong)的(de)离心管有(you)两种:大(da)腹式尖底离心管和(he)普通尖底离心管。前者(zhe)为50毫升、30毫升和(he)15毫升；分别(bie)是。后(hou)者(zhe)主要是10毫升和(he)5毫升。

(6)其他:如三角(jiao)烧瓶、烧杯、量筒、漏斗、注射(she)器等。

细胞培养温度

为了保(bao)持培养细胞(bao)(bao)的旺盛(sheng)生(sheng)长(zhang)，必(bi)须保(bao)持恒定和适当的温(wen)度(du)(du)。不(bu)同种类的细胞(bao)(bao)对培养温(wen)度(du)(du)也有不(bu)同的要(yao)求。

人(ren)类细胞(bao)培(pei)养的标准(zhun)温(wen)度是(shi)36.5±0.5。偏离(li)这个温(wen)度范围会(hui)影(ying)响细胞(bao)的正常代(dai)谢，甚至导致(zhi)死(si)亡。

培(pei)养细(xi)(xi)胞(bao)对(dui)低温的耐(nai)(nai)受(shou)性(xing)(xing)强(qiang)于对(dui)高温的耐(nai)(nai)受(shou)性(xing)(xing)。当(dang)温度上升(sheng)不超(chao)过39℃时(shi)，细(xi)(xi)胞(bao)代(dai)谢与温度成正比。人类细(xi)(xi)胞(bao)可(ke)以(yi)在39-401小(xiao)(xiao)时(shi)内(nei)受(shou)损，但仍有可(ke)能(neng)恢复。在40-411小(xiao)(xiao)时(shi)内(nei)，细(xi)(xi)胞(bao)通常(chang)会(hui)受(shou)损，只(zhi)有一小(xiao)(xiao)部分可(ke)能(neng)会(hui)恢复。41-421小(xiao)(xiao)时(shi)，细(xi)(xi)胞(bao)严重受(shou)损，大(da)多数(shu)细(xi)(xi)胞(bao)死(si)亡，单(dan)个细(xi)(xi)胞(bao)仍有可(ke)能(neng)恢复。当(dang)温度超(chao)过43℃1小(xiao)(xiao)时(shi)，所有细(xi)(xi)胞(bao)死(si)亡。

相反，当温(wen)度不(bu)低于0时，它对细胞代谢有(you)影(ying)响，但没(mei)有(you)有(you)害影(ying)响。当细胞被放置(zhi)在(zai)25-35时，细胞仍然(ran)可以存(cun)活和生长，但是速度减(jian)慢了。4小(xiao)时后(hou)(hou)，细胞在(zai)返(fan)回37个培(pei)养(yang)物后(hou)(hou)仍能继续(xu)生长。

随着温度降(jiang)低，细(xi)胞代谢变慢。当温度降(jiang)至冰点(dian)以下时(shi)，细(xi)胞会因细(xi)胞质结冰受损而死亡。然而，如(ru)果一定(ding)量的防(fang)冻剂

大多数细(xi)胞的(de)适宜酸(suan)(suan)碱(jian)度为7.2-7.4，偏离这(zhei)一范围将(jiang)对细(xi)胞培养(yang)产生有害影响。然而，细(xi)胞的(de)耐酸(suan)(suan)性(xing)(xing)(xing)(xing)高于耐碱(jian)性(xing)(xing)(xing)(xing)，这(zhei)更有利于细(xi)胞在部分酸(suan)(suan)性(xing)(xing)(xing)(xing)环境(jing)中生长(zhang)。然而，一些细(xi)胞也喜(xi)欢在碱(jian)性(xing)(xing)(xing)(xing)环境(jing)中生长(zhang)。例(li)如，成纤(xian)维细(xi)胞最合适的(de)酸(suan)(suan)碱(jian)度是7.4-7.6。每个细(xi)胞都有其最佳的(de)酸(suan)(suan)碱(jian)度。